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    大鼠嗅球切除模型

    点击次数:333 发布时间:2018-12-25

    大鼠嗅球切除模型

    动物嗅球切除后可出现许多行为学改变,如自发活动增加、学习记忆功能降低、应激反应增强、进食和性行为改变等,这些可能与改变了不同脑区5-HT能系统功能有关。

    (1)复制方法

    1)手术方法  雄性大鼠,体重为250~300g,手术前至少3~4d每日数次的抚摸。将大鼠分组,以水合氯醛(按350~400mg/kg体重的剂量)或戊丨巴丨比丨妥丨钠(按50~60mg/ kg体重的剂量)经腹腔注射麻醉后,剪除头颈部毛发,皮肤常规消毒。固定动物在立体定位仪上,两耳连线中点纵向将皮肤切开,暴露颅骨。在冠状缝和矢状缝交点向前7mm、旁开2mm处用牙钻分别钻两个2mm直径的小孔。用探针向下向前破坏嗅球后用真空泵吸出。用止血海绵填充小孔(或用牙托粉水泥封孔),缝合皮肤,肌肉注射青霉素钠盐(每只4万U连续注射3d)。每组动物按实验设计每天分别给予待测药物或生理盐水。术后14d左右即可进行实验。

    实验前应预先解剖1~2只动物观察并测定钻孔位置,吸除嗅球时应小心不要损伤额叶皮层。实验结束后应解剖去嗅球动物以证实是否摘除嗅球。

    2)测试方法

    ①被动回避实验

    跳台被动回避  电击箱(30cm×30cm×28cm)底部为金属栅条可通电,箱内有一跳台(7cm×30cm×4.5cm)。将大鼠先置于电击箱内(不予电击)使之熟悉环境1min,然后将大鼠放在平台上,一旦大鼠触及金属栅条就遭遇0.6mA的电刺激,直到大鼠在平台上连续呆上3min或遭遇10次电击为止。记录至此时大鼠遭电击的总次数。

    大鼠嗅球切除后遭受电击的次数明显增多,反映了嗅球切除可引起被动回避反应的欠缺。给予抗抑郁药后,可减少动物遭电击的次数。

    避暗被动回避实验箱由明暗两室组成,两室底部为不锈钢栅条,条间距离为1cm。两室的隔板底部中央有一通道(7cm×7cm)供大鼠出入。暗室的不锈钢栅条与电刺激仪相联,如果大鼠进入暗室,则遭遇电击。将大鼠先放入暗室,并给予一次电击,大鼠将逃至明室,当大鼠重新进入暗室时,将再次受到电击,此时记录为1次,直到大鼠在明室连续呆上2min遭受电击达20次,记录此时大鼠遭受电击的总次数。

    ②主动回避实验  实验箱内设有条件刺激装置,为光刺激(实验箱两长侧壁的底部装有红外光电管);底部为不锈钢栅条,与电击装置相连,为非条件刺激(电击刺激)。实验包括60个试行周期,每个周期分为条件刺激期、非条件刺激期及间歇期。如果大鼠在条件刺激期移动并切断两端的光束,则可避免电击,记录为“回避反应”。如果在非条件刺激期切断光束,则电击立即终止,记录为“逃避反应”。如果切断光束发生于间歇期,则记录为“自发反应”。

    大鼠嗅球切除后,回避反应次数明显增多,逃避失败次数显著降低,表明嗅球切除后主动回避反应能力增强。当给予抗抑郁药后,主动回避反应能力遭破坏。

    (2)模型特点与比较医学  由于嗅球与边缘系统功能有关,影响行为、情绪和内分泌,因此大鼠切除双侧嗅球后被动回避学习能力下降、自主活动能力增多、主动回避反应能力增强等。这些反应部分与嗅球切除后通过改变不同脑区5-HT能系统功能有关,抗抑郁药能特异性地逆转这些行为变化。此模型的抑郁效果明显、可靠性好,且抑郁动物的病理生理学改变与人类抑郁相似,对检测抗抑郁剂有较高的选择价值,常用于抗抑郁药的次筛以及作用机制的研究。其缺点在于对实验中手术技术的要求高和动物的死亡率较高。术前术后的每日抚摸对于减少术后动物的易怒性及测试时的行为差异很重要。

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