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天天彩票>公司动态>孔源性视网膜脱离动物模型

1 药物液化与机械液化结合法

(1)动物模型复制方法  经眼部检查无异常,体重为2.0~2.5kg的新西兰兔,将兔固定冲洗双眼后用1%阿托品眼药水散瞳,按30mg/kg体重的剂量经耳缘静脉注射苯丨巴丨比丨妥钠麻醉。开睑器开睑,于角巩膜缘后4mm处剪开,球结膜作巩膜板层切口,用7号针头刺穿巩膜。在显微镜和角膜接触镜观察下将针头引向拟行视网膜脱离的部位,将针头尽量接近视网膜但不可触及,随后将注射器中的透明质酸酶0.2ml(3000U)注入视网膜表面,抽取局部玻璃体0.2ml再缓慢注入,反复3~5次。后抽取0.3ml快速冲击视网膜,借助高速液流冲破视网膜形成视网膜裂孔,拔出针头,缝合巩膜及结膜切口,涂红霉素眼膏。

(2)动物模型特点  术后1~3d裂隙灯眼底镜观察可见房水闪烁、玻璃体轻度混浊;3d后眼底清晰,视网膜裂孔形状呈圆形、卵圆形、火山口状。视网膜脱离:术后7d,平均1.42象限;术后14d,平均1.97象限。病理检查证实视网膜脱离存在。

(3)比较医学  视网膜脱离的形成具备2个条件:玻璃体液化和视网膜裂孔形成。当液化的玻璃体通过视网膜裂孔到达神经上皮和色素上皮间隙并将两层组织分离,就形成了视网膜脱离。正常的玻璃体呈水凝胶状态,胶原纤维构成玻璃体的支架,透明质酸黏附其上。越靠近视网膜,玻璃体的支架结构越致密,所以即使视网膜裂孔存在,正常的玻璃体也难以通过裂孔进入视网膜下,视网膜脱离就不能形成。因此要建立视网膜脱离模型将玻璃体液化。本模型方法在玻璃体腔内注入透明质酸酶,将玻璃体支架中的透明质酸分解,使它失去吸附水分的能力,再用注射器反复抽取玻璃体,利用针头的狭小空腔破坏玻璃体的胶原纤维支架,从而在极短时间内将玻璃体充分液化。高速液流极易将视网膜冲破形成视网膜裂孔。视网膜裂孔的形状与冲击针头的方向有关,当针头与视网膜垂直时,形成的裂孔成火山口状或爆破状;当冲击力小时,则呈圆形;当针头倾斜时,形成的视网膜裂孔则呈圆形或卵圆形。裂孔形成时伴有局部视网膜脱离。本方法可以快速有效地建立视网膜脱离模型,有助于临床研究视网膜脱离的发病机制、影响因素、治疗方法及预后等。

2 机械注射法

(1)复制方法  选用体重为2.0~2.5kg新西兰兔,经肌肉注射速眠新注射液0.5~0.6ml麻醉,常规消毒后手术贴巾贴眼并沿睑裂剪开,沿角膜缘剪开结膜。分别于6:00,12:00距角膜缘3mm处板层巩膜缝线牵拉,6:00距角膜缘后12mm处定为裂孔部位。12:00牵引点旁开3mm穿刺,于6:00定位裂孔处为顶压部位,以12号平口注射针自穿刺口进入,在间接检眼镜直视下,使针口接近视网膜,抽出0.5ml玻璃体。以50mm玻璃微管从穿刺口进针,在间接检眼镜直视下,以玻璃微管针口顶住自外部顶起的视网膜高点(定位裂孔处),助手注入生理盐水0.5ml。见视网膜球状隆起后,前后左右摆动玻璃微管,适度扩大裂孔直径约2mm,然后缝线封闭穿刺口。

(2)模型特点  采用本方法可成功造成裂孔和视网膜脱离,造成髓腺下方部分视网膜脱离。本方法的缺点是视网膜脱离保持时间不一致和自发性复位较快。

(3)比较医学  制作视网膜脱离动物模型就是将视网膜色素上皮与神经上皮分离,目前制作方法较多,且各种模型制作方法中注入视网膜下的物质种类也各不相同,分别有生理盐水、血液、透明质酸钠等。本模型制作方法与其他方法相比,用间接检眼镜简捷用法结合顶压定位裂孔造模,使得直视下操作更简便易行,裂孔部位一致,对穿刺和顶压的部位易定位,了模型手术方法和复制效果的一致性及标准化。

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