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杭州细胞划痕实验外包.(Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移能力的体外试验方法。其原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,即为“划痕”,划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。通过对不同时期划痕区域细胞状态的观察,对细胞的迁移能力进行判断。

 

杭州细胞划痕实验外包.注意事项:

一般做划痕实验,都是在无血清或者底血清状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略。

按照6孔板背后画线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,作为固定的检测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。

.流程:
1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3.第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4.用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5.放入37度5%CO2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。

                                                                             

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